大腸埃希氏菌簡(jiǎn)稱大腸桿菌，系人和溫血?jiǎng)游锖竽c段正常菌叢的主要成員之一，具有菌體 (O)、莢膜 (K) 和鞭毛 (H) 3種抗原，已確定的O抗原群有164個(gè)(序號(hào)排至171)、K抗原72個(gè)(序號(hào)排至103)、H抗原55個(gè)(序號(hào)排至57)。已知的血清型高達(dá)數(shù)千種。通常無(wú)病原性或?yàn)闂l件致病菌，但數(shù)目有限的血清型為初生幼畜腹瀉的常見(jiàn)病原菌，它們具有粘著素性菌毛和腸毒素兩種致病因子，故名產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(Enterotoxigenic E.coli，ETEC)。這類菌毛主要有豬源ETEC的K88(F4)和987P(F6)以及豬、牛、羊源ETEC的K99 (F5) 和F41四種，均系蛋白質(zhì)，能特異地吸附于宿主小腸上皮細(xì)胞上。

　　腸毒素是引起腹瀉的直接致病因子，分不耐熱腸毒素(LT)和耐熱腸毒素(ST)兩種，多數(shù)K88+ETEC可產(chǎn)生LT和ST，而具其他粘著素性菌毛者一般只產(chǎn)ST。有上述菌毛的ETEC常與一定的O抗原群相聯(lián)系。引起斷奶仔豬腹瀉的大腸桿菌也常局限于某些特定的O抗原群。少數(shù)β溶血大腸桿菌能產(chǎn)生神經(jīng)毒素，是仔豬水腫病病原。本菌對(duì)幼兔可致腹瀉和敗血癥;對(duì)雞能引起腸炎、敗血癥、腹膜炎、氣囊炎和肉芽腫；對(duì)產(chǎn)卵母鵝和種公鵝可致生殖器官感染。在基因工程中被廣泛應(yīng)用，作為質(zhì)粒的接受菌和基因表達(dá)。

　　檢測(cè)方法

　　檢測(cè)大腸埃希氏菌等的傳統(tǒng)方法包括多管發(fā)酵法和濾膜法。多管發(fā)酵法適用于各種樣品，但操作復(fù)雜，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，濾膜法主要用于檢測(cè)雜質(zhì)較少的水樣，操作比多管發(fā)酵法更為簡(jiǎn)單，但是不適合檢測(cè)高濁度和其他復(fù)雜水樣。這兩種方法都具有檢測(cè)周期長(zhǎng)，程序繁瑣的缺點(diǎn)，難以適應(yīng)污染源快速診斷的需要。

　　目前，國(guó)內(nèi)外研究人員已經(jīng)發(fā)展了一些新方法進(jìn)行大腸埃希氏菌等的快速檢測(cè)，主要包括酶底物法、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR)、免疫分析法、生物傳感器法等。其中酶底物法是已經(jīng)納入國(guó)標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù) (PCR)、免疫分析法、生物傳感器法等方法還不成熟。與傳統(tǒng)方法相比，國(guó)標(biāo)酶底物法雖然將檢測(cè)時(shí)間縮短至24h，但是仍然不能滿足快速檢測(cè)的需要。以酶底物法為原理開(kāi)發(fā)出來(lái)的在線實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)儀器價(jià)格昂貴，而且基本上都是以進(jìn)口產(chǎn)品為主。

　　提供一種檢測(cè)水中大腸埃希氏菌的方法，該方法能夠快速檢測(cè)出水中大腸埃希氏菌。提供如下技術(shù)方案：

　　步驟一、提供一系列不同濃度的大腸埃希氏菌菌懸液，濃縮，分別加入到檢測(cè)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，然后記錄各濃度下的大腸埃希氏菌菌懸液的特征時(shí)間，所述特征時(shí)間為各濃度下的大腸埃希氏菌菌懸液在365nm激發(fā)光下產(chǎn)生 450nm熒光的熒光強(qiáng)度達(dá)到240時(shí)的時(shí)間，建立大腸埃希氏菌菌懸液濃度和 特征時(shí)間的線性方程；

　　步驟二、將待測(cè)水樣濃縮，加入步驟1所述檢測(cè)培養(yǎng)液培養(yǎng)，在其410nm 吸光度有明顯變化的前提下，記錄待測(cè)水樣特征時(shí)間，將其代入到步驟1中的線性方程中獲得待測(cè)水樣中大腸埃希氏菌的濃度；其中，所述檢測(cè)培養(yǎng)液包括Tryptone、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銨、氯化鈉、氯化鈣、亞硫酸鈉、吐溫-80、NaH2PO4·H2O、K2HPO4·3H2O、 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷、3號(hào)膽鹽。

　　在本檢測(cè)方法中，只有吸光度有明顯變化且熒光強(qiáng)度達(dá)到所設(shè)定的閾值240，才可認(rèn)定為存在大腸埃希氏菌，然后通過(guò)熒光強(qiáng)度定量檢測(cè)出水樣的大腸埃希氏菌濃度。如果只有吸光度有明顯變化，而熒光強(qiáng)度超過(guò)10h未達(dá)到閾值240，或者只有熒光強(qiáng)度在10h內(nèi)達(dá)到閾值240，但吸光度未有明顯變化，則不能認(rèn)定待測(cè)水樣中存在大腸埃希氏菌。雙標(biāo)準(zhǔn)的選擇極大地增加了檢測(cè)的準(zhǔn)確性，杜絕了其他影響因素的干擾。發(fā)明基于酶底物法的原理，以吸光度和熒光強(qiáng) 度為標(biāo)準(zhǔn)，采用適合于大腸埃希氏菌的檢測(cè)培養(yǎng)液，能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出水中大腸埃希氏菌的濃度，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)水中微生物污染情況。

　　-脫氧腺苷(2-deoxyadenosine)是天然的脫氧核苷，是脫氧核糖核酸(DNA)的有 機(jī)組成部分，也是基因藥物和基因工程研究的重要原材料，具有很好的生理活性。2′-脫氧腺苷本身有一定藥用價(jià)值，可抑制由糖誘導(dǎo)的胰島素釋放，并且能夠降低特異性磷酸二脂酶抑制劑或腺苷環(huán)化酶激活劑促進(jìn)胰島素分泌的作用。雖未有報(bào)道其可直接用于抗病毒，但是可作為一種重要的原料，經(jīng)過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)改造得到的2′-脫氧腺苷類似物是很多抗病毒、抗腫瘤、抗艾滋病核苷類藥物的良好中間體。

　　提供一種利用大腸埃希氏菌轉(zhuǎn)化生產(chǎn)2′-脫氧腺苷的方法，通過(guò)直接采用具有高核苷磷酸化酶活性的大腸埃希氏菌菌體作為酶源，將其與作為轉(zhuǎn)化反應(yīng)底物的脫氧胸腺嘧啶核苷及腺嘌呤混合進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)合成2′-脫氧腺苷。